發(fā)酵罐液體菌種在接種前一定要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，這是菇行天下一直以來的觀點(diǎn)，為什么一定要檢測(cè)，在上一篇文章中菇行天下有詳細(xì)的論述?，F(xiàn)在菇行天下給大家介紹一下液體菌種的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法，普通栽培戶可以借鑒一下，根據(jù)自己的現(xiàn)有條件進(jìn)行檢測(cè)。
1、取樣：
取樣應(yīng)該在接種前的24小時(shí)進(jìn)行，韓國(guó)生產(chǎn)的發(fā)酵罐一般沒有檢測(cè)口，只能從接種口取樣，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的發(fā)酵罐都有取樣口，取樣環(huán)節(jié)會(huì)給發(fā)酵罐帶來染菌的機(jī)會(huì)，這也是一些工廠不愿意進(jìn)行取樣檢測(cè)的原因，所以取樣必須操作熟練，按照嚴(yán)格無菌操作程序進(jìn)行，取樣容器一般為滅過菌的500ml三角瓶。
2、樣品接種培養(yǎng)：
液體菌種樣品培養(yǎng)可以用試管和平皿，菇行天下建議使用平皿檢測(cè)，觀察更容易。在無菌狀態(tài)下，將樣品均勻倒在提前制備好的平皿培養(yǎng)基上，封口，在30℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一個(gè)樣品做三個(gè)重復(fù)。
3、樣品第一次鏡檢：
用剩余的樣品進(jìn)行顯微鏡檢測(cè)，顯微鏡檢測(cè)分兩種，直接檢測(cè)和革蘭氏染色，菇行天下建議兩者都要進(jìn)行。直接檢測(cè)，在鏡下很容易觀察到可以游動(dòng)的桿菌等，而革蘭氏染色的好處是經(jīng)過染色處理，能夠分辨出細(xì)胞壁、細(xì)胞核等需要染色才能看清的結(jié)構(gòu)。
除了在顯微鏡下觀察是否有細(xì)菌存在，還有一點(diǎn)，就是要觀察菌絲的大小、形態(tài)是否符合該品種菌絲的特征，霉菌在液體狀態(tài)也會(huì)形成菌絲，比如青霉，青霉的菌絲比食用菌的菌絲要粗得多，還會(huì)形成孢子梗。而正常的菌絲，隔膜明顯，鏡下會(huì)發(fā)現(xiàn)大量的鎖裝聯(lián)合存在。鏡檢為一次否決，即在鏡下發(fā)現(xiàn)一處細(xì)菌，即可判定樣品染菌。
4、確認(rèn)平皿中培養(yǎng)的樣品
24小時(shí)候觀察平皿培養(yǎng)基上的樣品，如果出現(xiàn)非食用菌的菌落，證明樣品不存，帶有細(xì)菌，則可以判定發(fā)酵罐染菌。如果平皿表面只有食用菌菌絲萌發(fā)，且沒有光滑、奶酪狀的液體出現(xiàn)，則判斷發(fā)酵罐正常。
5、對(duì)平皿培養(yǎng)基上的樣品進(jìn)行第二次鏡檢，同樣一次否決。
如果兩次鏡檢和平皿培養(yǎng)都沒有問題，則可做出結(jié)論，該發(fā)酵罐沒有染菌，可以投入生產(chǎn)接種。
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